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儀器設備

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Nanodrop分光光度計操作規(guī)程

發(fā)布日期:2023-11-28    作者:     來源:     點擊:
  1. 1.雙擊電腦屏幕上的Nanodrop圖標,啟動軟件.

  2. 2.選擇所需的測量模式,屏幕上會彈出初始化儀器的提示.往儀器的加樣孔中加入1.5微升的蒸餾水,合上上蓋使形成液柱,然后點擊確定以開始初始化,可以聽見電磁閥開合的聲音.

  3. 3.五六秒后屏幕上的提示信息消失,表示初始化完成.用擦鏡紙將蒸餾水擦干凈,加入1-2微升的Buffer,合上上蓋并點擊Blank.

  4. 4.Blank完成后,用擦鏡紙將Buffer擦干凈即可以開始上樣,點擊Measure開始測量.

    建議: 在每次測量完畢后,,用蒸餾水清潔樣品平臺,,這樣可以保證下一次測量的準確性,。

    每次測量的樣品量建議不少于2微升

    圖一 圖二

    圖三 圖四

  5. 5.測量完成后,點擊Show Report查看結果,選擇Save進行保存.

  6. 6.保存的數(shù)據(jù)對應地保存在C:\Nanodrop Data文件夾.

    :  具體的實驗方法如BCA,Bradford等以及標準曲線的建立請參閱生物學資料和說明書

    名詞:

    Nuclear Acid Measurement:  核酸測量

    Protein 280:  280nm波長測量蛋白,選擇適當?shù)牡鞍最愋?/span>(BSA,IgG),軟件將在測量后給出吸光度值并自動計算其濃度

    MicroArray Measurement:  使用不同的熒光染料來測定核酸濃度

    UV-vis Measurement:  連續(xù)波譜掃描,可用于尋找最大吸收峰

    Cell Cultures:  600nm波長測量菌密度

    Protein BCA:  BCA法測蛋白

    Protein Bradford:  Bradford法測蛋白

    Protein Lowry:  Lowry法測蛋白

    User Preference:  用戶對于軟件的默認設置做一些修改

    Utility & Diagnostics:  性能診斷

    Sample Type:  選擇樣品的類型

    l: 使用者自己輸入波長,并查看樣品在此波長的OD

    Abs:  吸光度值

    A260 10mm Path: 常規(guī)的分光光度計使用的比色杯寬度約為10mm,即測量光程為10mm,與常規(guī)分光光度計不同的是,Nanodrop的測量光程是1mm0.2mm.但是軟件會自動將所測得的吸光度值轉換成10mm光程對應的值. A260 10mm Path就是指10mm測量光程時樣品在260nm波長時的OD

    A280 10mm Path: 10mm測量光程時,樣品在280nm波長時的OD

    Dye: 染料

    Max Absorbance: 使用者自己輸入縱軸的最大量程

    Hi Abs: 點擊此鈕用于測量高濃度樣品(最高至10mm測量光程的75A ),儀器將采用0.2mm光程測量

    Replicate#: 測量重復樣品或重復的標準品時的計數(shù)器

    Reset This Std: 清除所選標準品的所有重復樣品